本发明公开了一种耗时较短的多花黑麦草抗草甘膦植株筛选方法。本发明采用多花黑麦草成熟种子作为外植体，将多花黑麦草成熟种子清洗灭菌后接种到愈伤组织诱导培养基中培养18～22d得到愈伤组织，接着将愈伤组织转入第一愈伤组织继代培养基中培养18～22d，再将其转入含有草甘膦的第二愈伤组织继代培养基中培养18～22d进行抗草甘膦愈伤组织筛选，再将筛选出的抗草甘膦愈伤组织转接到愈伤组织分化培养基中培养18～22d，当幼苗长至2～3cm时，将存活的幼苗接入生根培养基中培养20～30d，最后进行抗性苗移栽，通过上述方法可以快速获得具有草甘膦抗性的植株，所需时间较短，只需大约一百天即可。适合在生物技术领域推广运用。