本发明公开了一种独一味离体培养一步成苗培养基及其方法，该培养基使独一味试管苗叶片离体培养一步成苗。所述一步成苗培养基以MS培养基为基础培养基，补加不同浓度和组合的6-苄氨基嘌呤（6-BA），萘乙酸（NAA）和2，4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），试管苗叶片作为外植体接种后经愈伤组织诱导直接分化不定芽和不定根，一步获得独一味再生植株。本发明无需将初代培养基中诱导获得的愈伤组织转接于分化培养基中再生成苗，与离体培养多步再生成苗相比，其步骤简化，培养周期短，重复性好，成苗率高。