本发明公开了一种五节芒多倍体诱导方法，以五节芒的种子为外植体，诱导获得胚性愈伤组织之后，对带芽点的愈伤组织进行多倍体诱变，0.1％秋水仙素处理愈伤组织72h左右，可诱导获得四倍体再生植株，低浓度的秋水仙素不能产生加倍效应，高浓度会导致愈伤组织死亡或严重抑制愈伤组织再生能力。本发明提出的五节芒多倍体诱导方法，利用五节芒种子为外植体，取材不受季节限制，通过愈伤诱导，秋水仙素诱变，愈伤组织分化成苗，经过鉴定，最终得到多倍体材料，周期2-3个月，与常规育种相比，诱变时间大大缩短，为五节芒新品种选育提供了一条新途径。