本发明公开了一种生物膜角膜贴片及其制备方法与应用，具体是将同种异体来源的骨髓间充质干细胞种植于蚕丝蛋白生物膜上制成角膜贴片用于治疗角膜溃疡等角膜损伤。自人骨髓分离到单核细胞接种于a-MEM培养基中，扩增到第三代后按一定浓度接种于蚕丝蛋白生物膜上，共培养5d后进行移植手术。经动物实验证明，本角膜贴片具有良好生物相容性，避免了传统人工角膜基质对机体的毒性反应及诱发的排斥反应，植入后随着时间推移完全降解，角膜可恢复透明，能满足机体对视力的要求。