本发明涉及miR-431在制备治疗肌肉疾病的药物中的用途。具体地，本发明涉及miR-431在骨骼肌干细胞及其在治疗肌肉疾病中的功能，特别是肌肉损伤和肌营养不良中的用途。本发明还涉及miR-431在制备促进骨骼肌干细胞激活、增殖及分化的药物中的用途，以及治疗肌肉疾病的含有miR-431的药物组合物。