一种生物源缓释杀菌液及其制备方法和用途，属于生物农药技术领域。其特征在于以甲醇为溶剂，每千克甲醇中含有活性成分：汉防己碱160-280克，山柰酚50-170克，黄芪甙70-180克，龙胆苦苷100-240克；每千克甲醇中还含渗透剂70-230克、缓释添加剂100-300克。上述一种生物源缓释杀菌液，以植物体内天然存在的物质为活性成分，利用缓释剂的药剂释放速度，能控制药物释放速度，持续且高效的发挥抑菌活性，可以减少活性物质在环境中的光解和流失，避免药剂浓度的峰谷波动，使药物较平稳地持续发挥作用，从而达到减少药剂的用量，延长持效期。且具有制造方便，成本低廉、稳定高效等优点。