本实用新型公开了一种干细胞培养灌流装置，包括灌流瓶、饲养层细胞培养皿、细胞灌流槽和废液瓶，灌流瓶瓶口处设有第一滤头，所述细胞培养门的侧壁设置有若干层倾斜进液口，所有倾斜进液口的倾斜方向一致，所述灌流瓶1通过输入管与倾斜进液口相连，所述输入管上设有一可显示pH值和控制温度的第一控制器，饲养层细胞培养皿通过第一连接管与细胞灌流槽相连，第一连接管上设置有一可显示pH值和控制温度的第二控制器和第一蠕动泵，细胞灌流槽内设置有螺旋送料器，螺旋送料器内部设置有电加热丝。本实用新型具温度控制精确度高，且可以提高细胞的培养速率，既可满足干细胞的独立培养环境，以保证细胞纯度，又避免参杂饲养层细胞影响。