本发明还提出一种脐带间充质干细胞的制备方法，获取脐带组织；将脐带组织用沃顿胶消化液进行消化处理，并搜集消化液；其中，沃顿胶消化液包括透明质酸酶和硫酸软骨素ABC酶从消化液中分离提取脐带间充质干细胞。采用本发明的上述制备方法，酶消化的过程中采用透明质酸酶和ABC酶联合消化沃顿胶，整体上可以获得细胞品质最优的脐带间充质干细胞，并且避免了胰酶和胶原酶长期消化对细胞体的影响，最终制备得到的脐带间充质干细胞获取率较高；并且获得的干细胞具有更高的细胞活性和分化潜能。