本发明公开了一种人神经干细胞库的构建方法，步骤是利用人尿液分离获得人肾脏上皮细胞，传代培养人肾脏上皮细胞并部分冻存，诱导传代培养获得的人肾脏上皮细胞成神经干细胞，分离并扩增培养诱导获得的神经干细胞，鉴定该神经干细胞，冻存鉴定确认的神经干细胞，编码入库。本发明方法中全过程避免了使用胎牛血清，消除了异种蛋白的引入，减少了隐患；本发明方法将已经诱导成功并具有活性的干细胞保存并构建成库，使用时可实现3日内快速供给临床使用，且本发明方法中冻存细胞方式是冻存一定大小的神经球，冻存过程中保护剂分步导入，降温速率分级设定，使神经干细胞复苏后能保持较高的细胞活率和活性，显著高于目前常规的慢速低温冻存法。