本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及一种肝脏干细胞的培养基及培养方法。本发明提供的肝干细胞培养基包括基础培养基、HGF、SCF和LIF。本发明提供的肝干细胞的培养方法采用免疫磁珠于原代即对肝干细胞进行分离，然后培养于本发明提供的培养基。实验表明，在原代细胞的获得过程中，细胞损伤较小，经检测，活性维持在85％左右，且本发明提供的方法培养肝干细胞能够将增值速度提高1.5～2.8倍，经流式细胞检测，肝干细胞能够维持良好的干性。