本发明公开了N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法及其用途，以L-酪氨酸或D-酪氨酸为起始原料，经过酰化、缩合、水解和烷基化反应得到产物。与现有技术相比，本发明采用优化的合成路线和反应条件，所用反应原料和试剂价廉、易得，整个合成反应的条件比较温和，可控性强，操作简单；与专利2006102010164相比，本发明合成的产物收率由10%提高到30%，产物纯度由92%提高至99%；该合成工艺的重复性好，有利于进行工业化大生产。另外，生物活性研究表明：本发明制得的其中两个光学异构体对HBV？DNA有明显的抑制作用，可将其用于制备抗HBV感染的药物。