本发明涉及一种TAG代谢障碍型肥胖酵母模型的构建方法，包括：以酿酒酵母BY4742α单倍体为出发菌株，针对三酰甘油代谢中起主要作用的水解酶编码基因TGL3、TGL4进行敲除，同时高表达PAH1基因，人为制造TAG代谢障碍，造成胞内TAG过度积累，建立酵母肥胖模型，并利用该模型进行降脂药物的初步筛选及药效评价。本发明构建出的肥胖酵母模型主要有实验周期短，建设成本低，运行耗费少，操作简便等优势；能够为酵母和人类脂类代谢机制研究及降脂药效评价提供平台，是一个高效而可靠，简便快捷的降脂药物筛选模型。