本发明公开了甘草苷在制备大肠杆菌氟喹诺酮外排泵抑制剂中的应用，研究结果显示，甘草苷可以使耐药大肠杆菌（氟喹诺酮主动外排表型且acrA基因高表达菌株）的氟喹诺酮最低抑菌浓度明显降低、菌体内药物蓄积浓度明显增加、外排泵基因acrA表达量明显降低，从而可以提高耐药大肠杆菌对氟喹诺酮的敏感性，降低药物使用量，降低治疗成本，减少药物残留等食品安全问题；同时，甘草苷为植物中存在的天然化合物，无致畸、致癌等副作用，安全无毒；本发明不仅拓宽了甘草苷的应用领域，提高了甘草苷的市场价值，而且为抗感染治疗提供了一种高效、安全的细菌外排泵抑制剂。