本发明属于经济林木育苗技术领域，具体涉及一种澳洲茶油树无菌扦插快繁育苗的方法。所述的方法包含如下步骤：(1)外植体材料的选择与处理；(2)首次无菌株系的建立；(3)增殖培养；(4)生根培养；(5)移栽。本发明利用了扦插的技术，又利用了组织培养技术，因此扦插效率高，不受环境影响；通过自我离体繁殖，解决了扦插枝条来源的问题，无需消耗林地树木，不影响树木生长和精油提取，同时提高了繁殖效率。