本发明公开了一种循环冷却水生物粘泥剥离剂，其中，所述生物粘泥剥离剂含有聚氧乙烯醚型非离子表面活性剂、生物表面活性剂和渗透剂。本发明还提供一种利用本发明的循环冷却水生物粘泥剥离剂剥离循环冷却水系统中粘泥的方法，该方法包括将所述循环冷却水生物粘泥剥离剂投入到循环冷却水中。本发明提供的生物粘泥剥离剂可有效剥离循环冷却水系统的设备和管道内壁上沉积的生物粘泥，且由于采用可生物降解、环境友好型的生物表面活性剂替代部分化学合成表面活性剂，在减少化学合成表面活性剂用量的同时能够达到较好的生物粘泥剥离效果，可减少对环境的二次污染。