本发明涉及一种木薯脱毒苗快速扩繁方法，包括以下步骤：1、外植体采集和脱毒预处理；2、外植体表面消毒和茎尖剥取；3、茎尖一步诱导成苗培养；4、茎尖小苗的继代增殖培养；5、半定量RT-PCR法进行病毒检测；6、脱毒试管苗驯化移栽。该技术可以有效的去除木薯茎秆为营养繁殖体携带的各种病毒和病菌，培养出脱毒木薯苗，实现木薯苗的健康栽培和提纯复壮，其扩繁占用空间小，繁殖速度快，移栽成活率高，有效解决木薯健康种苗供应和不同国家地区间种质安全交流，减少病害发生和蔓延，为木薯可持续发展提供技术保障。