本发明公开了一种簸箕柳抗性苗的制备方法，包括外植体和制备和预培养、侵染菌液的制备、侵染、共培养、洗菌，分化筛选培养直至分化出可见卡那霉素抗性芽，转移到不定芽伸长筛选培养基上继续培养，待抗性芽伸长至1-2cm，将每个抗性芽分离独立，移入生根筛选培养基中培养，经过一段时间的继代培养即可得到完整的抗性苗。该方法包括从外植体选择、培养基筛选、激素调配、抗生素敏感性、培养条件等方面建立出簸箕柳抗性苗的系统制备方法，为林木基因功能研究提供新途径。