本发明公开了一种铁皮石斛种苗高效繁殖的方法。步骤包括a.选用铁皮石斛茎尖或无菌幼苗为外植体，进行拟原球茎的诱导及增殖培养；b.拟原球茎的分化成苗；c.丛生幼苗的生根壮苗培养；d.无菌苗的炼苗及移栽。本发明利用茎尖和无菌幼苗为外植体，避免了仅以茎芽及顶芽为外植体诱导拟原球茎，外植体来源受限的问题，可大量、快速、持续获得成熟的拟原球茎，拟原球茎发生率最高达99％，幼苗分化系数高达50株/0.1g拟原球茎，获取种苗周期仅需4个月，种苗整齐，生根率100％，根长5cm左右且根数多达10条/丛，移栽成活率可高达95％以上等优点，达到缩短种苗周期、提高繁殖系数、种质来源不受局限的目标。可快速生产大批量的种苗，适用于大规模生产。