本发明涉及MicroRNA-429在制备抗肝癌药物中的应用。本发明首次揭示miR-429在维持肝癌干细胞特性中起到重要的作用。高表达miR-429能够增强EpCAM+的肝癌干细胞的增殖、自我更新以及肿瘤形成能力；抑制miR-429的表达能够引起相反的效应。因此，miR-429可作为肝癌治疗的新靶点，miR-429抑制剂可作为肝癌治疗药物，同时对肝癌复发及转移起到预防作用。