本发明涉及诱导性表达多能性维持基因的有蹄类动物细胞系及其构建。本发明建立了利用可诱导系统(tet-on)表达维持多能性关键基因oct4的有蹄类动物成纤维细胞系，该细胞系具有病毒拷贝数低，oct4表达上调明显，细胞单细胞来源纯度高的特点。利用该细胞系作为核移植的供体细胞，用药物强力霉素诱导oct4的表达，可帮助核移植后卵细胞的重编程，以最终达到建立有蹄类动物胚胎干细胞的目的，进行各种转基因动物的育种。