本发明属于生物材料领域，公开了一种细胞外基质支架材料及其制备方法。本发明细胞外基质支架材料是通过体外单层高密度培养幼兔骨髓间充质干细胞，收集其分泌的细胞外基质,应用冻干技术及合适的交联剂将其制备成具有一定孔径和孔隙率的三维多孔状支架材料。该材料可以根据软骨缺损区或体外实验所需，任意修剪成合适的大小和形状，经环氧乙烷灭菌得到整体分装包。本发明细胞外基质支架材料以干细胞作为细胞外基质支架的材料来源，组织来源广、增殖能力强、自体即可获得充足的细胞量，避免了胚胎干细胞所牵涉的社会伦理学的问题。