本发明涉及生物技术领域，具体涉及AP-1家族蛋白c-Jun的截短型在维持胚胎干细胞多能性的方法和应用。本发明的目的是提供一种使用c-Jun的截短型维持胚胎干细胞多能性的方法和应用，可以不依赖于LIF而维持胚胎干细胞的多能性和自我更新，所述c-Jun的截短型为AP-1家族蛋白c-Jun的C端缺失和N端缺失。本发明涉及培养ES细胞的方法，所述方法涉及在无饲养层细胞和LIF的条件下培养胚胎干细胞，提供了胚胎干细胞在再生医学中实际应用的新途径。