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一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法
编号:S000013084 刷新日期: 有效日期至:2020-11-29 浏览:2506 对接邀请:0
意向价格: 面议
所在区域:中国 - 江苏 技术领域:医疗卫生 - 生物医药
转让类型:合作研发
专利类型:发明专利 技术成熟度:可以量产
供应描述
本发明公开了一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法:本方法首先从山羊睾丸组织、皮肤组织和小肠组织中提取总RNA,反转录获得cDNA片段,并以此为模版克隆获得山羊的Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc多能性转录因子的编码序列。利用胰酶消化法获得山羊及小鼠的胎儿成纤维细胞,并制备饲养层细胞和配制细胞培养液。利用体外转录试验获得的各多能性转录因子的mRNA,经脂质体2000介导,转染山羊胎儿成纤维细胞,以制备山羊iPS细胞。克隆扁平、致密、核质比大、克隆边界清晰和折光性强的细胞集落判定为山羊iPS细胞集落。采用单克隆挑取,分别用胰酶消化,单独接种至新的接种有饲养层的培养孔板中继续培养,以获得山羊iPS细胞系。
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机构地址:No.490, S.Ning'an Str., Yinchuan,Ningxia 查看地图
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