一种从人和哺乳动物组织中分离培养多潜能干细胞的方法。它是采用低浓度胰蛋白酶干细胞培养液培养并筛选组织中的具有发育全能性潜能干细胞。其中，去除血清的干细胞培养液可以保证在分离培养过程中多潜能干细胞不发生分化。而低浓度胰蛋白酶对组织中的多潜能干细胞具有筛选作用。用该方法能够从入和哺乳动物组织中分离培养表达胚胎干细胞标志基因Oct4、SSEA并且体外悬浮培养能够形成类胚体的多潜能干细胞。