本发明涉及药物领域，具体涉及注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法。其包括：取阿奇霉素B对照品，并用氯化钠注射液稀释为溶液，再用这些溶液按照注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素B注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用注入量定为阿奇霉素B的注入量限度；按照同样方法，测量阿奇霉素Gx和红霉素A偕亚胺醚的注入量限度；定量分析待测药中上述三种物质和阿奇霉素的含量C；根据每次最大用量以及公式计算，得到三种有关物质的杂质限度W₁、W₂和W₃；若≤W₁，且≤W₂，且≤W₃，则药物的有关物质含量达到安全水平，否则达不到安全水平。本发明实现了定量评价的目的。