本发明公开了一种氨肽酶N抑制剂，化学名称为：2-((S)-3-(3-((S)-2-氨基-3-苯丙基)脲)-2,6-二氧哌啶-1-基)-N-羟基乙酰胺盐酸盐，具有结构式(Ⅰ)的化合物：还公开了该化合物的制备方法和在抗肿瘤药物制备中的应用。本发明所得到的氨肽酶N抑制剂，在空间上与氨肽酶N的活性位点相匹配，因此在体内外抗肿瘤活性评价中都显示出较强的抗肿瘤活性。