本发明涉及一种油菜花粉总甾醇有效部位及其制备方法和应用。本发明有效部位总甾醇化合物含量为50%-90%(wt%)，总甾醇化合物为24-亚甲基胆甾醇、菜籽甾醇、31-去甲基环木菠萝烯醇、异岩藻甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇6种；该油菜花粉总甾醇有效部位以油菜花粉为原料，经破壁后有机溶剂提取，硅胶柱层析和C18反相中压色谱柱分离纯化，得到油菜花粉总甾醇有效部位。本发明通过动物实验说明油菜花粉总甾醇有效部位具有很好的抗前列腺增生和前列腺炎作用，可应用于制备治疗前列腺增生及前列腺炎症的药物制剂中，为前列腺疾病患者提供一种疗效更佳的药物，具有较大的实际应用价值和较好的社会效益。