本发明提供了一种检测细胞内自噬信号通路的试剂、PCR检测方法及其应用，本发明所述检测试剂包括检测AKT1基因、AMBRA1基因、APP基因、ATG10基因、ATG12基因等84个基因的PCR反应引物和内参GAPDH控制基因、ACTB控制基因、B2M控制基因。本发明将涉及自噬信号分子集中在一个平板上，通过做一次实时荧光定量PCR反应，反应细胞的生存状态，与正常的肺癌、肺细胞做对比，探讨自噬信号通路在肿瘤/正常细胞中的可能途径，为研究关键蛋白的调控提供最直接的证据；本发明从转录水平快速准确的找到自噬信号通路相关分子，为抗癌药物筛选、新靶向药物的机制探讨等提供了有力的工具。