一种环糊精胆固醇酰胺的制备方法，属于环糊精技术领域。本发明以乙二胺环糊精和胆固醇甲酰氯为原料，采用有机合成法制备得到环糊精胆固醇酰胺粗品，经过减压蒸馏，乙醚、水反复洗涤等步骤，制备得到环糊精胆固醇酰胺。本发明方法首次实现了环糊精胆固醇酰胺的制备，扩大了环糊精衍生物的范围，为功能性环糊精的工业制备提供了技术参考，扩大环糊精衍生物在生物活性药物领域的应用，为靶向药物制剂的生产提供一定的参考。