本发明涉及一种去甲斑蝥素衍生物脂质微球注射液及其制备方法，该注射液包含去甲斑蝥素酰亚胺衍生物、油相、水和表面活性剂，以制剂质量计本发明的配方组成为：油相 5%~30%、去甲斑蝥素酰亚胺N-烷基衍生物 0.001%~1%、表面活性剂 0.5%~7%、渗透压调节剂 1%~5%，其余为注射用水。本发明中去甲斑蝥素通过氨基与长链饱和烷烃基连接，大大提高了其脂溶性，且其脂溶性随饱和烷烃基链长的增加而提高。该脂质微球能将大于90%的药物载入脂质核心内部和（或）界面膜，大大提高了载药量和包封率，降低了注射时血管刺激性，提高了药物和脂质微球注射液的物理化学稳定性，延长药物体内作用时间，提高了疗效并降低了毒副作用。