本发明公开了一株施氏假单胞菌及其培养、固定化和应用。该菌株为施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri）WZUF25，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心登记入册编号为CGMCC NO.7685。该菌株进行好氧反硝化的适宜pH和温度范围广，不仅对NO₃^--N和NO₂^--N的去除率高，而且具有很高的同化NH₄⁺-N能力，可为同步硝化和反硝化提供种源。本发明同时提供采用活性炭-海藻酸钙包埋法制备的固定化施氏假单胞菌，其同样具有良好的去除NO₃^--N的能力和稳定性。