本发明涉及一种大花萱草叶片组织培养的方法，其具体步骤为，以大花萱草露地生长的幼嫩内层叶片为外植体，经过消毒处理，接种于诱导培养基中诱导形成愈伤组织，经愈伤组织分化增殖、芽诱导和生根诱导，形成大花萱草完整小苗，将大花萱草小苗移栽到基质中，长成正常的大花萱草植株。本发明应用萱草叶片进行组织培养，克服了萱草只能在花期采用花部器官进行组织培养扩繁的限制，可实现周年繁殖，有利于进行良种快繁，丰富园林应用中萱草的种类。