本发明提供一种野牛草愈伤组织诱导方法，其以野牛草种子为外植体，消毒后置于无菌滤纸上进行萌发，挑选已萌发长出胚根的种子，转入愈伤组织诱导培养基，在25±1℃条件下黑暗培养20-25天；所述的愈伤组织诱导培养基为MS培养基+2，4-D3.0-3.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，pH值5.8-6.0的固体培养基。本发明既排除了在消毒过程中消毒不彻底的种子在愈伤组织诱导过程中造成的污染现象，也排除了无生命力种子对愈伤诱导的干扰，同时也降低了操作的难度，免去了对成熟胚进行垂直切割的步骤，在简单易操作的基础上同时提高了愈伤诱导率，使其达到了90%以上。