本发明公开了一种南美蟛蜞菊体外快繁的两步法，属于南美蟛蜞菊的体外繁殖技术领域。用叶片作为外植体，接种于添加NAA的培养基上，诱导产生不定根，再转移到添加不同激素的MS培养基上诱导不定芽的产生达到再生植株的形成。利用该方法诱导南美蟛蜞菊不定根及及无菌再生植株，为遗传转化等分子水平研究该植物打下良好的基础。该方法公开的南美蟛蜞菊的体外繁殖方法，其方法简单可行，诱导率高，且诱导周期短。