本发明提供了一种构建通用植物表达载体的方法，属于生物技术领域。包括：构建含有启动子终止子的中间载体；利用中间载体将目的基因连入高效植物转化载体pCMBIA1300上，获得植物表达载体；将构建的植物表达载体转化水稻细胞，外植体在植物再生培养基中筛选被转化的再生植株(T₀代)，检测转化株系，获得转基因水稻。本发明方法可利用载体的双多克隆酶切位点构建植物表达载体，从而大大拓宽该方法的应用范围。