本发明涉及一种大叶藻愈伤组织的诱导方法，是以大叶藻花序为外植体，将经过表面消毒的花序切成3-5mm长接种到愈伤组织诱导培养基中进行愈伤组织的诱导，每半月转接一次，培养近1个月后花序轴两侧膨大，逐渐形成愈伤组织；所述愈伤组织培养基是以改良MS培养基为基础培养基，并添加2,4-D、水解酪蛋白、蔗糖、琼脂和海盐。本发明采用改良的MS培养基，可有效地促进大叶藻愈伤组织的诱导，为大叶藻组培再生苗的产生和快速繁殖的实现提供重要的技术支撑。