金铁锁悬浮细胞培养体系及其建立方法，所述建立方法使用金铁索毛状根为外植体诱导愈伤组织并建立悬浮细胞培养体系。本发明从毛状根高效诱导开始，以高效的毛状根诱导及培养为体系建立提供优良的外植体，首次利用CuCl₂处理金铁锁叶片，通过发根农杆菌侵染叶片，在叶柄和叶缘叶脉处2～4天即可发生毛状根，发根时间缩短，3～5天即可产生发根，诱导转化率大大提高，达到60％以上。然后经过筛选、脱分化、诱导产生愈伤组织，并经过草酸钙预处理制备悬浮细胞，悬浮细胞在改良的培养基中培养，培养的悬浮细胞次生代谢和生化遗传稳定，细胞不易退化，为从细胞中提取天然产物提供可靠的材料来源和物质基础。