本发明提供一种好氧反硝化菌剂，所述的菌剂中，含有施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌。另外公开了这种好氧反硝化菌剂的制备方法及其应用。本发明的施氏假单胞菌是从制皮革的工业废水中筛选出来的，最后经鉴定确定为本菌。从往常来说，本领域的人认为施氏假单胞菌为厌氧反硝化菌，本申请证实了本菌在好氧的条件下也能高效的反硝化，拓宽了施氏假单胞菌的使用范围，另外当两种菌剂联合使用的时候，可以大大的提高好氧条件下的反硝化的效率。