本发明涉及耐低温石油降解菌株、培养方法、及其应用。本发明的耐低温菌芽孢杆菌的培养方法包括：将石油污染土样利用生理盐水溶解，摇床振荡后静置分层，将菌悬液接入原油无机盐液体培养基中，摇床培养后取液体培养基中适量下层发酵液，接种至新鲜无机盐液体培养基中继续培养，如此反复进行5次。对所得菌液进行梯度稀释，涂布至原油无机盐固体培养基上培养，观察培养基菌落数量，选择数量适中的培养基，进行划线培养；反复驯化、划线培养，直至得到多株纯菌。本发明的耐低温菌芽孢杆菌优先降解原油组分中的中长链饱和烷烃，该菌可应用于石油烃降解和土壤或水体石油污染的生物修复中，尤其可用于低温环境。