一种贵州半蒴苣苔的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：取贵州半蒴苣苔顶芽作为外植体进行消毒；将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到丛生芽；将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养得到健壮植株；将所述健壮植株置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；取完整的带根苗进行炼苗后移植于石灰岩土壤生长一个半月，再移栽至大田。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量贵州半蒴苣苔的优质种苗，对贵州半蒴苣苔资源保护和可持续利用具有重要价值。