本发明属于干细胞技术领域，涉及一种胎盘间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法。所述胎盘间充质干细胞的无血清培养基包括DMEM基础培养基，还包括如下组分：维生素H、谷胱甘肽、重组人胰岛素、人血清白蛋白、转铁蛋白、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、干细胞生长因子、人干细胞因子和厚朴酚。本发明提供的无血清培养具有安全性高，可以显著提高胎盘间充质干细胞的增殖能力的优点，而且在培养过程中的可以较好的保持胎盘间充质干细胞的细胞形态和其干细胞特性，有利于该无血清培养基的推广和应用。