本发明公开了一种火焰南天竹的再生培养方法，包括：以火焰南天竹的叶片为外植体，接种于含有TDZ和2,4-D的再生培养基上进行再生培养，获得再生不定芽；将所述的再生不定芽置于芽伸长培养基上进行培养，获得无根植株；取所述无根植株的茎段进行生根培养，获得火焰南天竹再生植株。本发明建立了以叶片为外植体的火焰南天竹高效稳定的再生体系，通过改良培养基、培养条件，提高不定芽再生率，促进不定芽新梢生根，为火焰南天竹的分子生物学以及基因工程研究提供了一条新的途径，为火焰南天竹基因工程研究和基因转化提供基础。