一种西南凤尾蕨组织培养快速繁殖的方法，包括如下步骤：(1)取西南凤尾蕨的成熟孢子作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导出原叶体；(3)将原叶体置于MS诱导培养基中进行壮苗培养获得分化出苗的孢子体；(4)将所述分化出苗的孢子体置于1/2MS生根培养基中进行培养得到完整的生根苗。(5)取完整的生根苗进行炼苗后移栽至育苗大棚。采用本发明所述方法得到的植株粗壮、成活率高，能够在短期内提供大量优质的、适合栽培的西南凤尾蕨种苗，有效的解决西南凤尾蕨规模化育苗的问题。