本发明公开了一种大花萱草的繁殖方法，包括如下步骤：（1）选择外植体并消毒处理；（2）将消毒后的外植体接种到芽诱导培养基上，送入培养室进行芽诱导培养；（3）将分化后的外植体转移到继代培养基上进行继代培养，得到分化苗；（4）将分化苗接种到生根培养基上进行生根培养；（5）炼苗、移出培养室进行移栽；其中，所述大花萱草为二倍体或多倍体。本发明在消毒时间和效果、操作方法和再生效率、生产成本等方面都明显优于其他植物组培快繁，所以建立的规模化商品生产体系稳定、能够满足规模化快繁生产。本发明主要应用于大花萱草新品种的快速扩繁，使其快速走向市场的一种有效途径，改变国内新品种推出较慢的现状。