本发明提供一种多倍体大花萱草组培方法，同时还公开了适用于本发明组培方法的培养基，本发明方法提高了多倍体大花萱草的繁殖系数，弥补了传统组织培养技术的一些不足，如降低了外植体的污染率、提高了愈伤组织分化率和移栽成活率等。通过外植体采集、外植体消毒效果、生根效果、移栽苗成活率等方面均优于以往萱草品种的组培快繁技术，所建立的规模化商品生产体系稳定，生产周期只需2个月左右。加快多倍体大花萱草繁殖速度，打破繁殖的季节限制，实现育苗工厂化生产。本发明的组培配方是多倍体大花萱草大量扩繁的最佳组合，可以快速大量的繁殖组培苗，适应园林绿化市场需求。