本发明公开了一种澳洲坚果的组织培养快速繁殖方法，包括：从澳洲坚果成年树上截取4cm长含有芽的茎段为外植体，将外植体进行消毒处理；将得到的外植体进行诱导培养20-24天，温度为23-25℃，光照强度为2000-2200Lux，每天光照13-15h；将培养出的新长腋芽苗在无菌条件下切成只带一个腋芽的茎段，接入生根培养基在温度为25-27℃培养，依次包括三个阶段：第一阶段，置于2200-2400Lux每天光照14-16h培养12-14天；第二阶段，置于黑暗下培养8-10天；第三阶段，置于2800-3000Lux每天光照18h培养直至生根。本发明解决了澳洲坚果组织培养生根难、生根率低的问题。