本发明公开了一种油茶无性系组培外植体脱毒方法，包括如下步骤：（1）将油茶无性系组培外植体进行低温预处理；（2）将低温预处理后的油茶无性系组培外植体用乙醇消毒，冲洗，然后用HgCl₂处理；其中，所述的HgCl₂处理是分两次以上对油茶无性系组培外植体进行间歇性处理，HgCl₂处理的总时间为4～20分钟，HgCl₂每处理一次后用水冲洗。本发明的方法操作简单，污染率低，克服了传统保存率低的技术问题。