本发明涉及一种野生型的抗菌肽Hydramacin-1蛋白突变体及其制备方法。通过对天然抗菌肽Hydramacin-1活性中心的查找，在确定活性中心的基础上，对第八个氨基酸苏氨酸以天冬氨酸或其他氨基酸进行了替换，结果证明此突变体T8D具有更优良的抗菌性。本发明还公开了一种利用酵母表达该突变体蛋白的方法，方法简单，表达出的蛋白具有较高的抗菌活性，可以应用在生物制药、养殖业、食品工业、饲料工业等领域，具有广泛的应用前景和经济意义。