本发明提供了一种人胚肺成纤维二倍体细胞株SLF-1及其应用。该SLF-1细胞的保藏编号为CGMCC？No.4875，该细胞特征明显，生长旺盛，生命期长，平均达67代次，且纯净无污染，培养方法简单，对多种病毒具有敏感性，可用于水痘带状疱疹病毒、肠道病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A16病毒、风疹病毒、甲肝病毒、狂犬病毒、轮状病毒的培养，进一步可用于制备针对上述病毒的疫苗，成本低廉，具有较好的经济价值和应用前景。