本发明提供了一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法，将能与二抗发生特异性免疫反应的一抗按不同稀释的浓度预先吸附在玻片上，一个浓度的一种多肽在玻片上经上样后形成一个小圆斑；或是将经过包埋的不同浓度的一抗石蜡切片预先放置在玻片上，与病理组织切片同时经历常规免疫组化操作步骤，以特定一抗的染色结果来判定免疫组化过程二抗显色系统的灵敏度及亲和力。